É um teste molecular que identifica a substituição de uma guanina por timina na posição 1849 do gene JAK2, resultando na mutação V617F (valina por fenilalanina). Essa alteração confere ativação anômala da via JAK-STAT, com efeito proliferativo em células hematopoéticas.

A técnica de PCR em tempo real (qPCR) permite quantificar a proporção de alelos mutados em relação aos alelos normais, fornecendo um indicador direto da carga tumoral.

O exame pode ser realizado em diferentes amostras biológicas, como sangue periférico, medula óssea ou fragmentos de tecido.

O exame é utilizado para:

• diagnosticar neoplasias mieloproliferativas, como policitemia vera (PV), trombocitemia essencial (TE) e mielofibrose primária (MF);
  
• diferenciar essas doenças de condições reativas (ex.: trombocitose ou eritrocitose secundárias);
  
• determinar a carga mutacional (alelo mutado vs. alelo selvagem), que pode ter impacto prognóstico e terapêutico;
  
• monitorar a resposta a terapias dirigidas, como inibidores de JAK, ou após transplante de medula óssea;
  
• avaliar risco de progressão para fases mais avançadas da doença, como mielofibrose ou leucemia aguda.

Após coleta do material (sangue periférico com anticoagulante, aspirado de medula óssea ou outro tecido indicado), realiza-se a extração de DNA. Por meio do qPCR, regiões específicas do gene JAK2 são amplificadas com primers e sondas específicas que distinguem a mutação V617F do alelo normal. A técnica permite quantificação relativa, geralmente expressa como percentual de carga alélica.

• Suspeita clínica e laboratorial de neoplasia mieloproliferativa, como hemograma persistente com eritrocitose, leucocitose ou plaquetose inexplicadas.
  
• Diferenciação entre policitemia vera e causas secundárias de policitemia.
  
• Esclarecimento diagnóstico de trombocitose crônica persistente.
  
• Monitoramento evolutivo em pacientes com diagnóstico confirmado de PV, TE ou MF.
  
• Acompanhamento da resposta terapêutica e detecção de doença residual mínima.

• Policitemia vera (presente em cerca de 95% dos casos).
  
• Trombocitemia essencial (presente em aproximadamente 50–60% dos casos).
  
• Mielofibrose primária (detectada em cerca de 50–60% dos pacientes).
  
• Síndromes mielodisplásicas/mieloproliferativas com fenótipo atípico.

• Não detectado: ausência da mutação V617F no gene JAK2.
• Detectado – baixa carga alélica: percentual reduzido de mutação, podendo indicar fase inicial ou baixa expansão clonal.
• Detectado – alta carga alélica: percentual elevado da mutação, frequentemente associado a maior risco de complicações e evolução da doença.

Os valores de referência podem variar conforme a metodologia empregada, mas geralmente resultados acima de 1–2% já são considerados positivos para mutação.

O exame pode ser solicitado principalmente por hematologistas, mas também por oncologistas clínicos e médicos internistas em contextos específicos. O resultado deve sempre ser interpretado em associação com exames clínicos, laboratoriais (como hemograma e biópsia de medula óssea) e achados histopatológicos.